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          猪细小病毒(CPV)Elisa试剂盒分析使用
          点击次数:368 发布时间:2013-05-03

          试剂盒使用说明书

          本试剂盒仅供研究使用。                                           48T

          使用目的:

          本试剂盒定性测定猪血液、或其它相关组织中细小病毒(CPV)。

          猪细小病毒(CPV)实验原理

          本试剂盒用双抗夹心酶联免疫ELISA测定标本细小病毒(CPV。用纯化的细小病毒(CPV)抗体包被微孔板,制成固相抗可与样?#20998;?/span>细小病毒(CPV)抗原相结合经洗涤除去未结?#31995;?#25239;体和其他成分后再与HRP标记的细小病毒(CPV)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后底物TMB显色。TMBHRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),与CUTOFF值相比较,从而判定标本中猪细小病毒(CPV)的存在与否。 

          试剂盒组成 

          1

          20倍浓缩洗涤液

          20ml×1

          7

          终止液

          3ml×1

          2

          酶标试剂

          3ml×1/

          8

          阳性对照

          0.5ml×1

          3

          标包被

          12孔×4

          9

          阴性对照

          0.5ml×1

          4

          样品稀释液

          3ml×1

          10

          说明书

          1

          5

          显色剂A

          3ml×1

          11

          封板膜

          2张  

          6

          显色剂B

          3ml×1

          12

          密封袋

          1

          标本要求: 

          1.标本处理:血清、血浆标本可直接检测

          2.标本按要求制备后尽早进行实验。如不能及时检测,可将标本在-20℃保存一个月,但避免反复冻融。

          3.不能检测含NaN3的样品,因NaN3?#31181;評备?#36807;氧化物酶的(HRP)活性。

          猪细小病毒(CPV)操作步骤

          1. 编?#29275;?#23558;样品对应微孔按序编?#29275;?#27599;板应设阴性对照2孔、阳性对照2孔、空白对照1孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)

          2. 加样:分别在阴、阳性对照?#23383;?#21152;入阴性对照、阳性对照(标准品)50μl。然后在待测样品孔先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,

          3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。   

          4. 配?#28023;?#23558;20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用

          5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤?#28023;仓?font face="Times New Roman">30秒后弃去,如此重复5次,?#27597;傘?/font>

          6. ?#29992;福?#27599;孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。 

          7. 温育:操作同3

          8. 洗涤:操作同5

          9. 显色:每孔先加入显色剂A 50μl,再加入显色剂B 50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟

          10. 终止:每孔加终止50μl,终止?#20174;?/font>(此时蓝色立转黄色)

          11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值) 测定应在加终止液后15分钟以内进?#23567;?/font>

          结果判定:

            试验有效性:阳性对照孔平均值1.00; 阴性对照平均值0.15

            临界值(CUT OFF)计算:临界值=阴性对照孔平均值+0.15

            阴性判定:样品OD< 临界值(CUT OFF)者为细小病毒(CPV)阴性

            阳性判定:样品OD 临界值(CUT OFF)者为细小病毒(CPV)阳性

          猪细小病毒(CPV)注意事项

          1.操作?#32454;?#25353;照说明书进行,本试剂不同批号组分不得混用。

          2.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包?#35805;?#24320;封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。

          3浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。

          4. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污?#23613;?/span>

          5.底物请避光保存。

          6.试验结果判定必须以酶标仪读数为准,使用双波长检测时,参考波长为630nm

          7.所有样品,洗涤液和各种废弃物?#21152;?#25353;传染物处理。终止液为2M的硫酸,使用时必须注意安全。

          保存条件及有效期

          1试剂盒保存:2-8

          2.有效期:6个月

           

          上海研盟生物科技有限公司 2008版权所有
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