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          大鼠细胞间粘附分子1(ICAM-1)作用分析

          点击次数:268 发布时间:2013/3/15
          提 供 商: 上海研盟生物科技有限公司 资料大小:
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          资料类型: PDF 浏览次数: 268
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          大鼠细胞间粘附分子1(ICAM-1)标本要求   点击这里给我发消息
          1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能
          马上进行试验,?#23665;?#26631;本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
          2.不能检测含 NaN3的样品,因NaN3?#31181;?#36771;根过氧化物酶的(HRP )活性。
          大鼠细胞间粘附分子1(ICAM-1)操作步骤
          1.   标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀
          释。
          240 ng/L  5 号标准品  150µl 的原倍标准品加入 150µl 标准品稀释液
          120 ng/L  4 号标准品  150µl 的5 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
          60 ng/L  3 号标准品  150µl 的4 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
          30 ng/L  2 号标准品  150µl 的3 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
          15 ng/L  1 号标准品  150µl 的2 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
           
           
          2.   加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、
          待测样品孔。在酶标包?#35805;?#19978;标准品准确加样 50µl,待测样品?#23383;?#20808;加样品稀释液 40µl,
          然后再加待测样品 10 µl(样品zui终稀释度为 5 倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽
          量不触及孔壁,轻轻晃动混?#21462;?
          3.   温育:用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。      
          4.   配?#28023;?#23558;30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用
          5.   洗涤?#30418;?#24515;揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每?#20934;?#28385;洗涤?#28023;仓?0秒后弃去,如此
          重复5 次,?#27597;傘?
          6.   ?#29992;福?#27599;?#20934;?#20837;酶标试剂 50µl,空白孔除外。  
          7.   温育:操作同 3。
          8.   洗涤:操作同 5。
          9.   显色:每孔先加入显色剂 A50µl,再加入显色剂 B50µl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色
          15分钟.
          10.  终止:每?#20934;?#32456;止液50µl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
          11.  测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。  测定应在加终止
          液后15 分钟以内进?#23567;?/span>

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