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          猴子胰高血糖素(GC)Elisa试剂盒作用分析

          点击次数:321 发布时间:2013/6/5
          提 供 商: 上海研盟生物科技有限公司 资料大小:
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          资料类型: PDF 浏览次数: 321
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          猴子胰高血糖素(GC)操作步骤
          1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀
          释。
          80pg/ml 5 号标准品 150μl 的原倍标准品加入 150μl 标准品稀释液
          40pg/ml 4 号标准品 150μl 的5 号标准品加入 150μl 标准品稀释液
          20pg/ml 3 号标准品 150μl 的4 号标准品加入 150μl 标准品稀释液
          10pg/ml 2 号标准品 150μl 的3 号标准品加入 150μl 标准品稀释液
          5pg/ml 1 号标准品 150μl 的2 号标准品加入 150μl 标准品稀释液
          2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、
          待测样品孔。在酶标包?#35805;?#19978;标准品准确加样50μl,待测样品?#23383;?#20808;加样品稀释液 40μl,
          然后再加待测样品 10μl(样品zui终稀释度为 5 倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽
          量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
          3. 温育:用封板膜封板后置 37℃温育30 分钟。    
          4. 配?#28023;?#23558;30倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30倍稀释后备用
          5. 洗涤?#30418;?#24515;揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每?#20934;?#28385;洗涤?#28023;仓?30秒后弃去,如此
          重复5 次,?#27597;傘?br />6. ?#29992;福?#27599;?#20934;?#20837;酶标试剂 50μl,空白孔除外。
          7. 温育:操作同 3。
          8. 洗涤:操作同 5。
          9. 显色:每孔先加入显色剂 A50 μl,再加入显色剂 B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色
          15分钟.
          10. 终止:每?#20934;?#32456;止液 50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
          11. 测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止
          液后15分钟以内进?#23567;?/span>

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          猴子胰高血糖素(GC)计算
          以标准物的浓度为横坐标,OD 值为纵坐标,在坐标纸上绘出标?#35760;?#32447;,根据样品的OD?#28068;?#26631;?#35760;?#32447;查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标?#35760;?#32447;的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,?#27425;?#26679;品的实际浓度。

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